中华绒螯蟹家系规模化构建初探

从中华绒螯蟹苏南养殖群体、长江干流野生群体和苏北里下河养殖群体中选择100组大规格亲蟹(雌蟹175 g以上,雄蟹250 g以上),进行家系规模化构建,成功定向构建家系169个,其中全同胞家系25个,半同胞家系144个,家系构建成功率84.5%,选择40个发育良好的家系进行育苗,最终获得23个家系蟹苗。     

脊尾白虾GAPDH基因的克隆及其内参基因稳定性分析

为比较甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、18S rRNA和β-actin基因在脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)作内参基因的优劣,本研究采用同源克隆和RACE技术,克隆了脊尾白虾GAPDH基因全长cDNA序列(GenBank登录号:KX893516),通过实时荧光定量PCR(quantative real-time PCR,qPT-PCR)技术,检测3种基因在脊尾白虾不同组织及不同蜕壳后时间点的表达量变化,在此基础上进行内参稳定性分析。结果显示,脊尾白虾GAPDH基因全长1514 bp,开放读码框1002 bp,编码333个氨基酸,二级结构预测显示GAPDH蛋白具有一个高度保守的NAD~+结合功能域(NAD binding domain)和行使糖运输和代谢的催化功能域。分析qRT-PCR结果并结合ge Norm、Norm Finder和Best Keeper 3种软件的分析发现,在不同组织和不同蜕壳后时间点,3种内参基因的稳定性由高到低依次为18S r RNA、GAPDH、β-actin。因此,在脊尾白虾不同组织和不同蜕壳后时间点的定量分析中,选取单内参基因时,推荐使用18S rRNA为内参基因,双内参时推荐18S rRNA和GAPDH,而18S rRNA、β-actin和GAPDH在其他生理条件下作内参基因的稳定性还有待进一步研究。     

CRISPR/Cas9系统介导大鼠Inhba基因的编辑

利用chopchop网站对大鼠Inhba基因的第二外显子设计sgRNA位点,通过合成sgRNA寡核苷酸、酶切连接构建到px330载体,再转染px330–Inhba–sgRNA载体到大鼠L6细胞,通过T7E1酶切、T载体克隆测序来验证sgRNA编辑Inhba基因的效率。结果表明：转染pX330–Inbha–sgRNA载体后,Inhba基因的编辑区域的PCR产物能被T7E1酶切割预期条带;T载体克隆测序显示,随机选取的20个单克隆中有5个克隆在预期切割位点附近出现不同长度的碱基缺失,估测编辑效率为25%。可见,本研究设计的sgRNA能够有效利用CRISPR/Cas9系统对Inhba基因进行编辑。     

不同生物饵料组合对脊尾白虾幼体变态发育的影响

本研究以脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)幼体为研究对象,研究了牟氏角毛藻(Chaeroeeros moelleri)、褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)和卤虫(Artemia salina)无节幼体搭配投喂对脊尾白虾幼体的存活率(SR)、变态发育和消化酶的影响。结果显示,单一卤虫组的幼体变态发育速度最快,14 d内全部变态为仔虾,其他3组则需要15 d;单一卤虫组、牟氏角毛藻+卤虫组和轮虫+卤虫组的幼体变态为仔虾时的SR分别为84.33%、84.67%和83.00%,各组间差异不显著(P>0.05);投喂牟氏角毛藻+轮虫+卤虫混合饵料组的幼体在Z5~P阶段大量死亡,变态为仔虾时的SR为35.67%。单一卤虫组投喂的脊尾白虾幼体的胃蛋白酶(1.94 U/mg prot)、脂肪酶(2.35 U/mg prot)和α-淀粉酶(0.13 U/mg prot)活力在4个组中最高,牟氏角毛藻+轮虫+卤虫组的胃蛋白酶(0.08 U/mg prot)、脂肪酶(0.91 U/mg prot)和α-淀粉酶(0.08 U/mg prot)活力在4个组中最低;牟氏角毛藻+卤虫组和轮虫+卤虫组的α-淀粉酶活力均为0.12 U/mg prot,而轮虫+卤虫组幼体的脂肪酶(1.78 U/mg prot)和胃蛋白酶(0.39 U/mg prot)比牟氏角毛藻+卤虫组分别高0.35和0.04 U/mg prot。研究表明,在脊尾白虾育苗过程中,投喂卤虫无节幼体(3~5 ind./mL),能提高幼体SR和加快变态发育速度,同时,在养殖过程中加入一定的牟氏角毛藻可减缓养殖水体恶化的速度。     

虾肝肠胞虫感染对脊尾白虾肠道菌群的影响

为探究虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei, EHP)感染对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)肠道菌群的影响,本研究基于16S rRNA基因的测序结果,对感染EHP的脊尾白虾肠道菌群进行了分析。结果显示,感染虾与健康虾肠道菌群差异较大,且其肠道菌群结构多样性显著低于健康虾。研究发现,病虾中归属于变形菌门(Proteobacteria)的脱硫弧菌科(Desulfovibrionaceae)、弧菌科(Vibrionaceae)、未分类蓝细菌科(unidentified Cyanobacteria)、支原体科(Mycoplasmataceae)和未分类α变形菌科(unidentified Alphaproteobacteria)为优势菌,而归属于厚壁菌门(Firmicutes)的乳杆菌科(Lactobacillaceae)、双歧杆菌科(Bifidobacteriaceae)、芽孢杆菌科(Bacillaceae)及噬几丁质杆菌科(Chitinophagaceae)细菌在健康虾中占据优势地位。EHP侵蚀导致感染虾肠道内潜在致病菌显著增加(P<0.05),增加了其他疾病的易感性。此外,通过Tax4Fun功能预测,发现感染虾肠道菌群主要用于新陈代谢,从而抵抗EHP侵染,维持机体正常功能;健康虾肠道菌群则多用于个体生长与环境信息处理,进而保证生长与存活。本研究从虾肠道菌群结构方面入手,进一步探究了EHP感染对脊尾白虾肠道菌群的影响,以期为EHP的防治提供帮助。     

煤污病胁迫下3个薄壳山核桃品种的光合特性

为探究煤污病对薄壳山核桃光合特性的影响,以Stuart、Wichita、Pawnee 3种受煤污病危害程度不同的品种为对象,测定染病叶片及健康叶片的光合参数、光响应曲线以及叶绿素荧光参数.结果表明:煤污病可显著影响薄壳山核桃叶片的光合气体交换,3个品种染病叶片光合气体交换参数[净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、胞间CO2浓度(Ci)及气孔导度(Gs)]较健康叶片均出现显著下降(P<0.05),其程度从大到小依次为Stuart>Wichita>Pawnee.就Pn而言,Stuart染病叶片下降61.07％,Wichita染病叶片下降51.26％,Pawnee染病叶片下降40.62％.光响应曲线显示,3个品种染病叶片的最大净光合速率(Pnmax)均显著低于健康叶片,暗呼吸速率(Rd)与健康叶片无显著差异,表观量子效率(AQY)均显著低于健康叶片,光补偿点(LCP)均显著高于健康叶片.3个品种染病叶片的叶绿素荧光参数(Fv/Fm、ΦPSⅡ、ETR、qP)相比于健康叶片,整体而言均出现了下降,但未达到显著水平.说明煤污病可造成薄壳山核桃叶片光合速率下降,净光合速率下降程度为40.62％～61.07％.染病叶片利用弱光的能力下降,合成的光合产物减少,而实际光合效率并未显著降低,光合机构仍较为稳定.     

苏紫猪运动量与生长性能关系的研究

苏紫猪是在江苏省自主培育品种苏钟猪与江苏地方猪种淮猪杂交后，再与引进的巴克夏外种猪杂交选育而成的优质黑猪培育新品系，具有繁殖力高、肉质好、抗逆性强特点，另外产肉率及瘦肉率适中、肉品质优且耐贮藏，以其优良的产肉性能和出色的肉质品质受到广泛关注。     

猪只肌内脂肪沉积调控机制研究进展

肌内脂肪（Intramuscular Fat，IMF）是指肌肉样品中通过化学方法提取的脂肪，是嵌入在猪肌肉纤维之间的脂肪组织，主要来源于脂肪细胞和肌细胞。     

日粮中添加花生藤粉对淮猪育肥后期生长性能、胴体性状和肌肉品质的影响

花生藤粉是花生收获后形成的一种农副产品，含有丰富的粗蛋白质、粗脂肪、碳水化合物、粗纤维等营养物质。花生藤粉不仅营养丰富，而且质地松软，可以作为一种优质的畜禽饲料原料。花生藤粉主要用于牛、兔、羊、鹅等草食动物生产中，通过合理的调制、微生物发酵等，可以提高饲料利用率，有利于草食动物生长发育和肌肉品质的改善。近年来生产中发现，花生藤粉也可作为一种粗纤维饲料应用于养猪生产中，但添加比例和应用范围尚不明确，需要进行深入研究。